羊布鲁氏菌病免疫操作技术规范

来源:新疆自治区畜牧兽医局 发布日期:2019-12-30 阅读:1483

本标准按照 GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分:标准的结构和编写》给出的规则起草。

本标准由乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心提出。

本标准由新疆维吾尔自治区畜牧厅归口。

本标准起草单位:乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心、乌鲁木齐市达坂城区畜牧兽医站、新疆兵团畜牧兽医工作总站、石河子大学。

本标准主要起草人:蔡扩军、李爱巧、马卫平、王涛、郭亚军、杨小亮、乔军、李惠、施远翔、阿依努尔﹒何孜尔、杨启元、李岩、魏学峰。


羊布鲁氏菌病免疫操作技术规范

1 范围

本标准规定了羊布鲁氏菌病(以下简称羊布病)免疫操作的术语和定义、疫苗使用过程中免疫效力保证、人员防护、免疫接种、免疫抗体监测的技术要求。

本标准适用于羊布鲁氏菌病的免疫工作。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB 16548  病害动物和病害动物产品生物安全处理规程

GB/T 18646 动物布鲁氏菌病诊断技术

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1  

批次 batch

具有相同代码、组成均一的全部疫苗。

3.2  

剂量 dosage

标签上标定的特定年龄羊,经特定免疫途径,一次接种疫苗的使用量。

3.3  

效力 potency

根据生产商建议使用生物制品所产生的特异的免疫保护能力。

3.4  

注射免疫 immunization by injection  

将疫苗(菌苗)通过肌肉、皮下、皮内等途径注入机体,使之获得免疫力的方法。

3.5  

口服免疫 oral immunization

将疫苗稀释灌服或拌入疫苗的饲料喂给动物使之获得免疫的方法。

3.6  

饮水免疫 immunization by dringking

将疫苗或稀释的疫苗,通过饮水输入动物体内使之获得免疫力的方法。

3.7  

点眼免疫  immunization via conjunctiva sac

将疫苗或稀释的疫苗滴入动物结膜囊内,使动物获得免疫力的方法。

3.8  

滴鼻免疫 immunization by nostril-droping

将疫苗或其稀释物滴入动物鼻腔,使之获得免疫力的方法。

3.9  

消毒压尘 disinfection and dustproof

是指通过喷雾的方式消毒,以减少空气中飞扬的尘土,消灭尘土中携带的病原微生物,达到消毒和降低尘土颗粒的数量,防止病原微生物通过附着在尘土上被人吸入而感染疫病。

3.10  

免疫监测 immune surveillanc

抽检免疫动物群体的抗体水平,以监控群体的免疫状态,为实施计划免疫和增强免疫提供技术依据。

3.11  

应免羊 sheep should be immunized

3月龄以上的临床健康羊(不包括种羊、怀孕羊、奶山羊及28d内屠宰上市的育肥羊)。

3.12  

抗体阳转率 seroconversion rate

家畜布病疫苗免疫后21d30d进行抽样,采用虎红平板试验,检测出抗体阳性数量占抽样数量的百分比例。

4 免疫效力保证

4.1 疫苗的选择

4.1.1 根据当地羊布病主要流行菌型,选择匹配的疫苗进行预防接种。

4.1.2 根据饲养羊的数量,准备足够完成一次免疫接种所需要的经国家批准生产、同一厂家、同一批次的疫苗。

4.2 疫苗的种类

农业部批准生产的疫苗。

4.3 疫苗的运输和贮藏

4.3.1 夏季疫苗应采用冷藏运输。

4.3.2 疫苗贮藏温度参照不同疫苗各自的说明书执行。

4.4 疫苗使用要求

4.4.1 应免羊的要求

应免羊临床表现健康。种羊、乳用羊不免疫。

4.4.2 疫苗的检查

疫苗使用前,要仔细检查外包装是否完好,是否真空,标签是否完整,包括疫苗名称、生产厂家、免疫剂量、生产批号、批准文号、保存日期或失效日期。如出现瓶盖松动,漏气、疫苗瓶破损、超过保质期、色泽与说明不符、物理性状有异常的疫苗,不得使用。

4.4.3 保定要求

羊只保定牢固,使疫苗有效进入到羊体内。

4.4.4 免疫密度

    应免羊全部实施免疫,不得漏免。

4.4.5 接种器具的准备

4.4.5.1 点眼器、滴鼻器:可使用玻璃滴管(带胶皮吸头)、塑料滴管或专用点眼瓶。

4.4.5.2 接种针头:接种时一般应使用9号针头,一羊一针头,避免交叉污染。

4.4.5.3 注射器:组装好的注射器和针头必须吻合无隙,洁净,畅通,不能漏液。

4.4.6 对免疫场地要求

在免疫前对免疫圈舍地面喷洒消毒水,灭菌、压尘。

5 人员防护

5.1 工作人员经过羊布病防护知识培训后方能上岗工作,最好为成立的专业布病防控队队员。

5.2 羊布病免疫时工作人员要使用全封闭式连续注射器或封闭式投药箱。

5.3 羊布病检测阳性及有外伤的人员不能从事羊布病免疫工作。

5.4 实施羊只保定和免疫的工作人员要做好人员防护工作。在保定和免疫中必须全程穿戴一次性防护服、胶靴,佩戴N95口罩、护目镜、帽子、一次性乳胶手套,在当日免疫工作结束后,对重复使用的胶靴、护目镜用消毒液浸泡消毒,对于一次性防护服、N95口罩、帽子、手套等进行焚烧或深埋处理。

5.5 参与保定和免疫的人员在免疫过程中,未经严格消毒,严禁接听电话、吸烟、饮食等与免疫工作无关的行为。

5.6 为安全起见,保定和免疫人员可以选择药物预防,连续用药3d~7d。

5.7 如果注射疫苗时针头扎破人皮肤,应立即用洁净手挤压伤口,酒精棉球擦拭消毒;如果出现疫苗和人的眼睛、皮肤直接接触等意外紧急情况,应立即用大量水清洗,并对皮肤进行消毒处理。建议服用药物3d~7d以预防感染布病。

5.8 工作人员操作完后,对手、皮肤裸露部分清洗、消毒。

5.9 出现波浪热、乏力、关节疼等疑似布病临床症状的人员要及时到当地卫生部门做布鲁氏菌病检测。

6 免疫接种

6.1 疫苗的稀释

疫苗稀释时要无菌操作,稀释液的剂量与免疫头份相匹配,稀释液要使用专用的稀释液或灭菌的生理盐水。稀释疫苗时,先把少量的稀释液加入疫苗瓶中,待疫苗溶解后,再注入稀释液的瓶子内,用稀释液把原疫苗瓶反复冲洗干净。或使用家畜布病疫苗连续注射器或专用灌服投药箱等,接种前将疫苗充分混合均匀,疫苗稀释后在2h内用完。

6.2 具体免疫接种操作方法

6.2.1 皮下注射法

羊站立保定,注射部位宜选择在肩前部,局部消毒,将皮肤提起,针头与皮肤呈45°角,朝远离头部的方向刺入,慢慢将疫苗注射皮下。

6.2.2 肌肉注射法

羊站立保定,注射部位宜选择在颈部上缘下1/3处,局部消毒,针头朝后方与皮肤表面呈45°角深度进针。

6.2.3 结膜点眼免疫法

    羊站立保定,使用专用滴注器在羊的结膜囊上方滴入稀释好的疫苗。

6.2.4 口服免疫

羊站立保定,将布病疫苗稀释,使用灌服投药箱按照不同疫苗各自的说明书规定菌量灌入羊口;或将疫苗混入饲料中,由羊自由采食。

6.3 接种方法的选择

接种方法均按不同疫苗各自的说明书规定操作。

6.4 接种剂量及免疫期

参照不同疫苗各自的说明书进行。

6.5 免疫接种时间

6.5.1 常规免疫

对于当年的羔羊:3月龄以上即可免疫;对于规模羊场,在母羊产后1个月或配种前30d进行免疫;对于散养户,一般在每年4~8月份配种前或转至夏牧场前进行集中免疫。

6.5.2 补免

在布病免疫期间怀孕的羊,在产后1个月实施补免;不足3月龄的羔羊足龄后实施补免;对免疫背景不清楚的应免羊实施补免。

6.6 接种器具及废弃物的无害化处理

6.6.1 封闭式家畜布病疫苗连续注射器、针头、家畜布病专用灌服投药箱和稀释药瓶等接种器具应湿热高压灭菌或用洁净水煮沸15min;不能使用湿热高压灭菌或煮沸条件的接种器具使用化学方法消毒,必须使用清水彻底清洗干净。

6.6.2 免疫中使用完的疫苗瓶、滴瓶、未用完的疫苗以及其他用具严格按照GB 16548的规定进行集中消毒后再做焚烧或深埋等无害化处理。

6.7 接种记录 

疫苗接种时应做好记录。免疫记录应包括羊耳标号、品种、性别、年龄、接种时间、接种地点、免疫疫苗种类、剂量、疫苗生产厂家、批次等项目,确保免疫时间、使用疫苗种类等信息准确详实、可追溯。

6.8 免疫前后注意事项

6.8.1 免疫前后3d禁止使用抗生素和环境消毒药物或含有抗生素添加剂饲料和发酵饲料;羊只免疫实施前、后3d禁止药浴。

6.8.2 免疫时通常先进行羊的布病免疫,在免疫7d后方可进行其他细菌病活疫苗或灭活疫苗的免疫;如果先免疫了其他细菌病活疫苗的,在免疫15d后方可进行布病免疫。对于健康状况较好的羊群,亦可以将口蹄疫、布病同时分点注射,或将小反刍兽疫和布病疫苗同时分点注射。

6.8.3 免疫后的羊3d内不要远距离放牧。

6.8.4 免疫后的羊28d内禁止屠宰上市。

6.8.5 免疫后死亡的羊严格按照GB 16548的规定进行无害化处理。

 

7  免疫抗体监测

免疫接种后21d30 d进行监测,采样数按相关规定抽样,在早晨喂饲前或停食8 h后,颈静脉采血5 mL,分离血清备检。按照GB/T 18646的虎红平板凝集试验(见附录A)进行监测。抗体阳转率达到70%以上即为合格,否则予以加强免疫。

 

A  

A           

附 录 A
(规范性附录)
虎红平板凝集试验

A.1 材料准备

A.1.1 抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供,按说明书使用。

A.1.2 受检血清应新鲜,无明显蛋白凝块,无溶血和无腐败气味。

A.1.3 洁净的一次性虎红平板反应纸,或洁净的玻璃板,其上划分成4  cm2的方格。

A.1.4 吸管或可调式单道移液器,适于滴加0.03 mL

A.1.5 平板凝集试验混匀器、移液器吸嘴、牙签或火柴杆,供搅拌用。

A.2 操作方法

A.2.1 将一次性虎红平板反应纸上各孔(或玻璃板上各格)标记受检血清号,然后加相应血清0.03mL

A.2.2 在受检血清旁滴加抗原0.03 mL

A.2.3 用吸嘴或牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合,形成直径约2cm的液体反应区,再双手拿起虎红平板反应纸板或玻璃板稍微来回轻晃数次。注意每份血清使用一个吸嘴或牙签。

A.2.4 每次试验应设阴、阳性血清对照。

A.3 判定

A.3.1 在阴、阳性血清对照成立的条件下,方可对被检血清进行判定。

A.3.2 受检血清在22℃±2℃条件下于4 min内出现肉眼可见不同程度的颗粒状或絮状的凝集现象者判为阳性(),无凝集现象,呈均匀粉红色者判为阴性()

B